產(chǎn)品概述
PrecisionNA dsDNA BR (Broad Range) Assay Kit 是一種簡(jiǎn)便、靈敏、精確的雙鏈 DNA (dsDNA) 熒光定量檢測(cè)試劑盒。本試劑盒包含熒光檢測(cè)試劑、緩沖液及 dsDNA 標(biāo)準(zhǔn)品。該試劑盒對(duì) dsDNA 樣本在 4 - 2,000 ng 區(qū)間具有優(yōu)秀的線性關(guān)系，可以對(duì)濃度為 0.2 - 2,000 ng/μl 的樣本進(jìn)行精確定量。該試劑盒對(duì) dsDNA 的選擇性高于 RNA，對(duì)一些常規(guī)的污染物，如鹽、游離的核苷酸、蛋白質(zhì)、溶劑、去污劑等都具有良好的耐受性。本產(chǎn)品操作簡(jiǎn)單，在室溫下即可進(jìn)行，使用前先將熒光檢測(cè)試劑用緩沖液稀釋成工作液，然后加入待測(cè) dsDNA 樣品，即可使用 Qubit 熒光儀進(jìn)行檢測(cè)。
產(chǎn)品組分
表格
|
組分
|
NA2602-01 (100 assays)
|
NA2602-05 (500 assays)
|
|
PrecisionNA dsDNA BR Reagent (200× in DMSO)
|
250 μl
|
1.25 ml
|
|
PrecisionNA dsDNA BR Buffer
|
50 ml
|
250 ml
|
|
PrecisionNA dsDNA BR Standard #1 (0 ng/μl in TE Buffer)
|
1 ml
|
5 ml
|
|
PrecisionNA dsDNA BR Standard #2 (100 ng/μl in TE Buffer)
|
1 ml
|
5 × 1 ml
|
保存條件
- 2 ~ 8℃避光保存，冰袋運(yùn)輸
- 推薦 PrecisionNA dsDNA BR Standard #2 于 -30 ~ -15℃ 長(zhǎng)期存放
適用范圍
0.2 - 2,000 ng/μl 的 dsDNA 樣本
注意事項(xiàng)
- 熒光染料存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
- 標(biāo)準(zhǔn)品及樣本在使用前請(qǐng)先顛倒混勻，避免吸取不均導(dǎo)致結(jié)果偏差。
- 為保證定量結(jié)果的精確，請(qǐng)使用校準(zhǔn)后的移液器進(jìn)行操作。
- 請(qǐng)?jiān)谑覝叵逻M(jìn)行定量檢測(cè)。使用前，將試劑盒中的各組分平衡至室溫。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，請(qǐng)勿長(zhǎng)時(shí)間用手握住檢測(cè)的 PCR 管，避免結(jié)果偏差。
- 請(qǐng)務(wù)必在樣本加入后 3 h 內(nèi)且避光條件下完成所有樣本的檢測(cè)，避免熒光淬滅導(dǎo)致結(jié)果偏差。
實(shí)驗(yàn)原理與流程概要
Fig 1. PrecisionNA dsDNA BR Assay Kit操作步驟:
- PrecisionNA Reagent、PrecisionNA Buffer按1:200稀釋得到Working Solution。
-
- PrecisionNA Standard #1、PrecisionNA Standard #2各取10μl，最終體積為200μl。
-
- dsDNA Samples取1 - 20μl，加入1 - 20μl及180 - 199μl相關(guān)液體，最終體積為200μl。
實(shí)驗(yàn)流程
以下步驟適用于Qubit熒光儀：
- 使用前，將試劑盒中各組分平衡至室溫。
- 取足夠數(shù)量的0.5 ml PCR管用于樣本和標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)。
- 在每支PCR管蓋上進(jìn)行標(biāo)注。請(qǐng)勿在PCR管側(cè)壁上進(jìn)行標(biāo)注，以免影響熒光信號(hào)的采集。
- 配制檢測(cè)工作液。取試劑中PrecisionNA dsDNA BR Reagent，用PrecisionNA dsDNA BR Buffer按照1:200的比例進(jìn)行稀釋，配制成檢測(cè)工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。禁止用玻璃容器配制檢測(cè)工作液。
- 應(yīng)準(zhǔn)備足量的檢測(cè)工作液。例如有7個(gè)待檢測(cè)的DNA樣本，加上兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品，則需準(zhǔn)備2ml的檢測(cè)工作液，取10μl的PrecisionNA dsDNA BR Reagent加入到1,990μl的PrecisionNA dsDNA BR Buffer，渦旋混勻，備用。
- 配制檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品。取190μl檢測(cè)工作液至標(biāo)準(zhǔn)品PCR管中，分別加入10μl Standard #1和Standard #2至相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品PCR管中。
- 制備檢測(cè)樣品。取180 - 199μl檢測(cè)工作液至檢測(cè)PCR管中，分別加入1 - 20μl待測(cè)dsDNA樣品，使得每個(gè)檢測(cè)樣品終體積為200μl。
- 若要添加1 - 2μl樣品，請(qǐng)使用2μl移液器以獲得最佳效果。
- 渦旋振蕩2 - 3 sec，離心收集液體到管底部，盡量避免產(chǎn)生氣泡。
- 將所有檢測(cè)PCR管置于室溫環(huán)境下避光孵育2 min。按照Qubit熒光儀的操作說(shuō)明，選擇dsDNA Broad Range程序測(cè)定濃度。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. |
