產品概述
PrecisionNA dsDNA BR (Broad Range) Assay Kit 是一種簡便、靈敏、精確的雙鏈 DNA (dsDNA) 熒光定量檢測試劑盒。本試劑盒包含熒光檢測試劑、緩沖液及 dsDNA 標準品。該試劑盒對 dsDNA 樣本在 4 - 2,000 ng 區間具有優秀的線性關系，可以對濃度為 0.2 - 2,000 ng/μl 的樣本進行精確定量。該試劑盒對 dsDNA 的選擇性高于 RNA，對一些常規的污染物，如鹽、游離的核苷酸、蛋白質、溶劑、去污劑等都具有良好的耐受性。本產品操作簡單，在室溫下即可進行，使用前先將熒光檢測試劑用緩沖液稀釋成工作液，然后加入待測 dsDNA 樣品，即可使用 Qubit 熒光儀進行檢測。
產品組分
表格
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組分
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NA2602-01 (100 assays)
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NA2602-05 (500 assays)
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PrecisionNA dsDNA BR Reagent (200× in DMSO)
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250 μl
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1.25 ml
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PrecisionNA dsDNA BR Buffer
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50 ml
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250 ml
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PrecisionNA dsDNA BR Standard #1 (0 ng/μl in TE Buffer)
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1 ml
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5 ml
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PrecisionNA dsDNA BR Standard #2 (100 ng/μl in TE Buffer)
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1 ml
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5 × 1 ml
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保存條件
- 2 ~ 8℃避光保存，冰袋運輸
- 推薦 PrecisionNA dsDNA BR Standard #2 于 -30 ~ -15℃ 長期存放
適用范圍
0.2 - 2,000 ng/μl 的 dsDNA 樣本
注意事項
- 熒光染料存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
- 標準品及樣本在使用前請先顛倒混勻，避免吸取不均導致結果偏差。
- 為保證定量結果的精確，請使用校準后的移液器進行操作。
- 請在室溫下進行定量檢測。使用前，將試劑盒中的各組分平衡至室溫。實驗過程中，請勿長時間用手握住檢測的 PCR 管，避免結果偏差。
- 請務必在樣本加入后 3 h 內且避光條件下完成所有樣本的檢測，避免熒光淬滅導致結果偏差。
實驗原理與流程概要
Fig 1. PrecisionNA dsDNA BR Assay Kit操作步驟:
- PrecisionNA Reagent、PrecisionNA Buffer按1:200稀釋得到Working Solution。
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- PrecisionNA Standard #1、PrecisionNA Standard #2各取10μl，最終體積為200μl。
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- dsDNA Samples取1 - 20μl，加入1 - 20μl及180 - 199μl相關液體，最終體積為200μl。
實驗流程
以下步驟適用于Qubit熒光儀：
- 使用前，將試劑盒中各組分平衡至室溫。
- 取足夠數量的0.5 ml PCR管用于樣本和標準品的檢測。
- 在每支PCR管蓋上進行標注。請勿在PCR管側壁上進行標注，以免影響熒光信號的采集。
- 配制檢測工作液。取試劑中PrecisionNA dsDNA BR Reagent，用PrecisionNA dsDNA BR Buffer按照1:200的比例進行稀釋，配制成檢測工作液，現配現用。禁止用玻璃容器配制檢測工作液。
- 應準備足量的檢測工作液。例如有7個待檢測的DNA樣本，加上兩個標準品，則需準備2ml的檢測工作液，取10μl的PrecisionNA dsDNA BR Reagent加入到1,990μl的PrecisionNA dsDNA BR Buffer，渦旋混勻，備用。
- 配制檢測標準品。取190μl檢測工作液至標準品PCR管中，分別加入10μl Standard #1和Standard #2至相應的標準品PCR管中。
- 制備檢測樣品。取180 - 199μl檢測工作液至檢測PCR管中，分別加入1 - 20μl待測dsDNA樣品，使得每個檢測樣品終體積為200μl。
- 若要添加1 - 2μl樣品，請使用2μl移液器以獲得最佳效果。
- 渦旋振蕩2 - 3 sec，離心收集液體到管底部，盡量避免產生氣泡。
- 將所有檢測PCR管置于室溫環境下避光孵育2 min。按照Qubit熒光儀的操作說明，選擇dsDNA Broad Range程序測定濃度。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. |
